title: Laelia colombiana

text: "Laelia colombiana" fue descrito por Julian Mark Hugh Shaw y publicado en "Orchid Review" 116(1282, Suppl.): 15. 2008. Laelia: nombre genérico que ha sido nombrado por "Laelia", una de las vírgenes vestales, o por el nombre romano de "Laelius", perteneciente a una antigua familia romana.


title: Laelia colombiana

text: colombiana: epíteto geográfico que alude a su localización en Colombia.


title: Águeda Pérez López

text: Águeda Pérez López (Ciudad de México, 5 de enero de 1974) es una deportista mexicana que compitió en taekwondo.


title: Águeda Pérez López

text: Ganó una medalla de plata en el Campeonato Mundial de Taekwondo de 1993, y dos medallas de plata en el Campeonato Panamericano de Taekwondo en los años 1990 y 1996. En los consiguió una medalla de bronce.


title: Antoni Morral

text: Antoni Morral i Berenguer (26 de agosto de 1957) es un maestro y político español. Desde el 26 de enero de 2019 es secretario general de Crida Nacional per la República, el partido independentista catalán promovido desde Bélgica por Carles Puigdemont.


title: Antoni Morral

text: Inició su carrera política en la formación Nacionalistas de Izquierda. En 1983 logró por primera vez el acta de concejal en el Ayuntamiento de Sardañola. Morral fue uno de los miembros más importantes en la fundación de Iniciativa por Cataluña en 1987 tanto a nivel catalán como a nivel de su villa. En 1995 dirigió el área de Medio Ambiente de la Diputación de Barcelona como diputado provincial donde fomentar las agendas 21 locales.


title: Antoni Morral

text: Tras las elecciones de 2003, fue elegido alcalde de Sardañola del Vallés gracias al acuerdo de gobierno entre su partido (ICV), el partido independentista de ERC y la derecha catalana de CiU, aunque la candidata del PSC fue quien más votos consiguió. Los comicios de 2007 y gracias a un acuerdo de su partido (ICV) nuevamente con CIU, con 12 concejales sobre un total de 25, consiguió renovar el mandato. El apoyo de los concejales de la derecha española del PP fue decisivo para que pudiera volver a ser alcalde, aunque esta fuerza política no entró en el gobierno. El resultado de la consulta hizo el PSC la fuerza más votada, como en todas las elecciones municipales, pero sin la mayoría suficiente para formar gobierno debido a la negativa de ICV de querer forjar un gran pacto de izquierdas con un total de 19 concejales de 25 que hay en el consistorio.


title: Antoni Morral

text: En septiembre de 2009 Morral destituyó de todos sus cargos a Consol Pla, primera teniente de alcalde y cabeza de lista de CiU, partido con el que su formación estaba coaligado. Esto provocó la rotura del pacto de gobierno y el inicio de una etapa de inestabilidad política en Sardañola. Por su extremada debilidad en el frente del gobierno local, donde ya no tenía mayoría, y después de muchas conversaciones entre todo los partidos presentes en el consistorio, el 3 de diciembre de 2009 se presentó una moción de censura firmada por los grupos municipales de PSC y CIU donde la candidata de esta moción era el actual portavoz del PSC Carmen Carmona Pascual. Finalmente, el 16 de diciembre de 2009 se votó la moción, ésta fue aprobada con una mayoría absoluta de 13 de 25 concejales del consistorio y como consecuencia Carmen Carmona fue investida alcaldesa. Antoni Morral terminó su discurso en el debate de la moción de censura diciendo "en 2011 nos encontraremos y nos veremos las caras", dando por supuesto que se volverá a presentar a las próximas elecciones.


title: Antoni Morral

text: Hasta el 2014 fue Secretario de la Asamblea Nacional Catalana.


title: Antoni Morral

text: En Elecciones al Parlamento de Cataluña de 2017 iba como número 18 de la circunscripción de Barcelona por la coalición Junts per Catalunya. Tras la renuncia de Joaquim Forn a su acta de diputado, entró como diputado del Parlamento de Cataluña en la legislatura XII.


title: Antoni Morral

text: En el congreso fundacional de Crida Nacional per la República celebrado el 26 de junio de 2019 resultó elegido secretario general de este partido independentista catalán promovido desde Bélgica por Carles Puigdemont.


title: Karel Javůrek

text: Karel Javůrek (Praga, 30 de julio de 1815 - Praga, 23 de marzo de 1909) fue un pintor checo. Estudió en la academia de Praga (con František Tkadlík y Christian Ruben), más tarde en Viena (con Danhauser) y en París (con Couture). En lugar del clasicismo italiano, se dejó influir por las escuelas del Occidente y Norte de Europa, inspirándose luego en la historia de la nación Checa.


title: Karel Javůrek

text: Entre sus obras destacan:


title: François Claudius Compte-Calix

text: François Claudius Compte-Calix (Lyon, 1813 - Chazay d'Azergues, 1880) fue un pintor francés del siglo XIX.


title: François Claudius Compte-Calix

text: Pintor, grabador y litógrafo francés nacido en Lyon el 27 de agosto de 1813 y muerto en Chazay d'Azergues el 20 de julio de 1880. Fue discípulo de Bonnefond en la Escuela de Bellas Artes de Lyon, estableciéndose en París en 1836.


title: François Claudius Compte-Calix

text: Adquirió grandísima reputación pintando cuadros anecdóticos y sentimentales, que correspondían a la corriente romántica que imperaba entre sus coetáneos: sus obras, cuyo dibujo no era siempre perfecto, tenían el colorido bonito y agradable y la pincelada fácil, siendo popularizados por todos los medios de reproducción durante el segundo tercio del siglo XIX.


title: François Claudius Compte-Calix

text: Su esposa, Celeste Compte-Calix, pintoó algunas obras pertenecientes al mismo género sentimental.


title: Paramesotriton labiatus

text: Paramesotriton labiatus, conocido comúnmente como tritón chino de cola de paleta o tritón cola de remo, es una especie de anfibios urodelos de la familia Salamandridae.


title: Paramesotriton labiatus

text: Es endémica de los montanos del centro-este de Guangxi (China).


title: Paramesotriton labiatus

text: Presenta un aspecto robusto pero alargado y estilizado llegando a alcanzar una longitud de 15 cm a diferencia del género "Cynops", la cabeza es plana y achatada con forma de pala destacando su gran boca. El dorso es de color marrón chocolate presentando normalmente rayas anaranjadas en los costados. Lo más característico de esta especie es su cola que termina en forma de remo o paleta (de ahí su nombre común). Otra diferencia con los "Cynops" radica en que su piel es muy lisa y no presenta un aspecto verrugoso además los dedos del "labiatus" son más rechonchos y menos definidos. La forma de su cola tiene su origen en que habita en cursos de aguas rápidas (arroyos de montañas) a diferencia de los "cynops orientalis" que moran en aguas tranquilas y estancadas. El vientre es anaranjado con patrones negros. Presenta dimorfismo sexual, las hembras son de mayor tamaño y robustez que los machos. En la época de reproducción los machos desarrollan marcas blancas en la cola, en esta época ponen la cola en forma de abanico y la mueven con ímpetu para dispersar las feromonas y atraer así a las hembras.


title: Paramesotriton labiatus

text: Es recomendable un acuario de 40-50 litros con algo de parte terrestre. Esta especie habita en aguas frías y de fuertes corrientes. Para que el agua esté limpia y oxigenada resulta útil emplear un sistema de filtrado que además provocará una ligera corriente en el agua, éstas corrientes también se pueden lograr utilizando una bomba de agua. En su hábitat no abunda la vegetación por lo que no es necesario incluir plantas en el acuario, sin embargo es conveniente incorporar refugios que permitan al animal esconderse. Hay que destacar su carácter agresivo y territorial, no es recomendable mantener más de un ejemplar en el mismo acuario ya que los ataques serán frecuentes. La alimentación debe ser variada: lombrices, babosas, tenebrios (gusanos de la harina), gusanos de seda, grillos, larvas rojas de mosquito, etc.


title: John Augustine Zahm

text: John Augustine Zahm (New Lexington, Ohio, 11 de junio de 1851-Múnich, 10 de noviembre de 1921) fue un escritor católico estadounidense, que también publicó bajo el seudónimo de H. J. Mazans y J. A. Manza.


title: John Augustine Zahm

text: Vivió en Notre-Dame, Indiana en 1871, en cuya universidad se licenció en letras. En 1875 fue director de la sección de Ciencias de esa casa de estudio, y en 1895 el papa León XIII le otorgó el doctorado en filosofía. Fue provincial de la orden religiosa paulista, también llamada de la Santa Cruz, en los Estados Unidos en 1897.


title: John Augustine Zahm

text: Perteneció a la Sociedad Francesa de Física, a la Sociedad Científica de Bruselas, a la de los Arcades de Roma y a la de Dante de Florencia.


title: Inas El-Said Anis

text: Inas El-Said Anis es una deportista egipcia que compitió en taekwondo. Ganó una medalla de bronce en el Campeonato Mundial de Taekwondo de 1993 en la categoría de –47 kg.


title: Asociación Nacional de Manufacturas

text: La Asociación Nacional de Manufacturas (en inglés, National Association of Manufacturers, NAM) es un grupo de defensa con sede en Washington D. C., Estados Unidos, con 10 oficinas repartidas por todo el país. Es la mayor asociación industrial y mercantil de los Estados Unidos, ya que representa 14,000 pequeñas y grandes empresas de fabricación de todos los sectores industriales y en los 50 estados. Jay Timmons ha liderado la organización como Presidente y CEO desde 2011.


title: Asociación Nacional de Manufacturas

text: Un artículo de Business insider del 2018 describió al NAM como un "gigante en la capital de Estados unidos, que recibe acceso sin restricciones a la Casa Blanca y a los principales legisladores del Capitolio. en 2018, El presidente de House Ways and Means, Kevin Brady, comento que la aprobación de la Ley de Empleos y Reducción de impuestos no habría ocurrido sin el liderazgo de la Asociación Nacional de Fabricantes.


title: Asociación Nacional de Manufacturas

text: El trabajo en materia de políticas del NAM se centra en las esferas del trabajo, el empleo, la atención de la salud, la energía, las finanzas corporativas, los impuestos, el comercio bilateral, el comercio multilateral, los controles de exportación, la tecnología, la política reguladora y de infraestructura. La organización enfatiza cuatro pilares que hacen grande a Estados Unidos: libre empresa, competitividad, libertad individual e igualdad de oportunidades


title: Asociación Nacional de Manufacturas

text: La NAM publica una Encuesta de Perspectivas de la Manufactura cada trimestre. A partir del segundo trimestre de 2018, según el NAM, el 95,1% de los fabricantes registraron una perspectiva positiva para su empresa, "el nivel más alto registrado en los 20 años de historia de la encuesta". La misma encuesta encontró que los fabricantes calificaron " la incapacidad de atraer y retener una fuerza laboral de calidad ”como su principal preocupación. El presidente Donald Trump mencionó la encuesta del NAM en un evento en la Casa Blanca en abril de 2018.


title: Asociación Nacional de Manufacturas

text: El Instituto de Manufactura de NAM es un 501 (c) 3 dedicado a desarrollar una fuerza laboral de manufactura moderna para ayudar a los fabricantes a obtener trabajadores capacitados, calificados y productivos para seguir siendo competitivos. El Instituto patrocina el Día de la Manufactura el primer viernes de octubre, un evento a nivel nacional para que los fabricantes reciban a estudiantes, padres y líderes de políticas y "aborden las percepciones erróneas comunes sobre la manufactura".


title: Asociación Nacional de Manufacturas

text: En 2017, el NAM lanzó el Proyecto de Responsabilidad de los Fabricantes (MAP), una campaña realizada a través del Centro de Acción Legal de Fabricantes (MCLA) para combatir las demandas frívolas y políticamente motivadas contra los fabricantes de energía. A agosto de 2018, tres de esas demandas habían sido desestimadas de los tribunales [8].


title: Asociación Nacional de Manufacturas

text: Según NAM, la industria manufacturera emplea a casi 12 millones de trabajadores, aporta más de $ 2.25 billones a la economía de los EE. UU. Anualmente, es el motor más grande del crecimiento económico en la nación y representa la mayor parte de la investigación y el desarrollo del sector privado. [1]


title: Centro Etnográfico Joaquín Díaz

text: El Centro Etnográfico Joaquín Díaz es un museo que se encuentra en Urueña, un municipio y localidad situada en la provincia de Valladolid, España. Fue fundado por el folclorista Joaquín Díaz González en 1985 y la sede definitiva se instaló en la Casa de la Mayorazga en marzo de 1991. Una exposición llamada "Amas de cría", pliegos de cordel, una colección de grabados, una biblioteca, una fonoteca, un espacioso zaguán y un museo de instrumentos.se alojan en este Centro Etnográfico.


title: Centro Etnográfico Joaquín Díaz

text: El centro etnográfico tiene dos plantas. En la planta baja se puede encontrar la exposición de "Amas de cría", la colección de grabados, el zaguán, y los pliegos del cordel, mientras que en la primera planta se puede visitar la colección de grabados y de instrumentos.


title: Centro Etnográfico Joaquín Díaz

text: El primer apartado situado en el zaguán son las Estampas de Trajes de Castilla y León de diferentes artistas de los siglos XVIII, XIX y XX. Los pliegos de cordel también son conocidos como "aleluyas" y tienen su origen en las estampas que la Iglesia repartía a sus fieles en las grandes ceremonias. Con el tiempo la producción de estos géneros fue decayendo, aunque en varias imprentas aún se conservan moldes de madera o cobre de las primeras aleluyas.


title: Centro Etnográfico Joaquín Díaz

text: En la colección de instrumentos, los instrumentos están divididos según la naturaleza de los sonidos que producen. Se pueden ver instrumentos pertenecientes a las cuatro grandes familias (aerófonos, idiófonos, cordáfonos y membranófonos).


title: Centro Etnográfico Joaquín Díaz

text: En los fondos documentales del museo se encuentran una fonoteca y una videoteca que contienen grabaciones relacionadas con el trabajo de campo realizado fundamentalmente en Valladolid y en las provincias de Castilla y León.


title: Centro Etnográfico Joaquín Díaz

text: En el museo también se pueden encontrar los gentilicios de los pueblos de la provincia de Valladolid.


title: Lee Seung-Min

text: Lee Seung-Min es una deportista surcoreana que compitió en taekwondo. Ganó dos medallas de oro en el Campeonato Mundial de Taekwondo en los años 1993 y 1995, y dos medallas de oro en el Campeonato Asiático de Taekwondo en los años 1990 y 1996.


title: CRISPR

text: Los CRISPR (en inglés clustered regularly interspaced short palindromic repeats, en español repeticiones palindrómicas cortas agrupadas y regularmente interespaciadas) son familias de secuencias de ADN en bacterias. Las secuencias contienen fragmentos de ADN de virus que han atacado a las bacterias. Estos fragmentos son utilizados por la bacteria para detectar y destruir el ADN de nuevos ataques de virus similares, y así poder defenderse eficazmente de ellos. Estas secuencias juegan un papel clave en los sistemas de defensa bacterianos, y forman la base de una tecnología conocida como CRISPR / Cas9 que efectiva y específicamente cambia los genes dentro de los organismos. En términos más técnicos son loci de ADN que contienen repeticiones cortas de secuencias de bases. Tras cada repetición siguen segmentos cortos de "ADN espaciador" proveniente de exposiciones previas a un virus. Se encuentran en aproximadamente el 40% de los genomas bacterianos y en el 90% de los genomas secuenciados de las arqueas. Con frecuencia se hallan asociados con los genes cas, que codifican para proteínas nucleasas relacionadas con los CRISPR. El sistema CRISPR/Cas es un sistema inmunitario procariótico que confiere resistencia a agentes externos como plásmidos y fagos y provee una forma de inmunidad adquirida. Los espaciadores de los CRISPR reconocen secuencias específicas y guían a las nucleasas cas para cortar y degradar esos elementos génicos exógenos de una manera análoga al ARNi en sistemas eucarióticos.


title: CRISPR

text: Desde 2013 el sistema CRISPR/Cas se ha utilizado para la edición de genes (agregando, interrumpiendo o cambiando las secuencias de genes específicos) y para la regulación génica en varias especies. Al administrar la proteína Cas9 y los ARN guía apropiados a una célula, el genoma de esta puede cortarse en los lugares deseados, cuyas secuencias serán complementarias a las de los ARN guía utilizados. Esto permite la eliminación funcional de genes o la introducción de mutaciones (tras la reparación del corte realizado por la maquinaria celular de reparación del ADN) para estudiar sus efectos. Modificaciones recientes del sistema CRISPR/Cas9 permiten también actuar sobre la transcripción de los genes, modificando así solo su nivel de funcionamiento, pero no la información genética.


title: CRISPR

text: Quizá puedan usarse los CRISPRs para construir sistemas de entrega de genes guiados por ARN que lleguen a alterar los genomas de poblaciones enteras.


title: CRISPR

text: Las bacterias pueden incorporar ADN externo en otras circunstancias e incluso pueden tomar ADN dañado de su medio.


title: CRISPR

text: Las secuencias repetidas que luego se conocerían como CRISPR fueron identificadas por primera vez por un grupo de científicos japoneses en 1987 (Yoshizumi Ishino et al).y luego más tarde de forma independiente por el científico Francisco J. M. Mojica (Universidad de Alicante) a principios de los años 90 en una arquea "Haloferax mediterranei" y los resultados fueron publicados en 1993, tras haber sido anteriormente descritas en bacterias ("Escherichia coli" y "Mycobacterium bovis"). Inicialmente fueron utilizadas para el tipado de bacterias, para diferenciar distintos aislados, cepas y especies. Estudios iniciales por Francisco J. M. Mojica y colaboradores postularon el posible papel de estas secuencias en la partición de replicones. En el año 2000, Francisco J. M. Mojica y colaboradores detectaron un gran número de estas secuencias repetidas en bacterias, arqueas y mitocondrias y propusieron el nombre de "Short Regularly Spaced Repeats" (SRSR, en castellano "Repeticiones Cortas Regularmente Espaciadas". Pocos años después, Francisco J. M. Mojica propuso y acuñó el acrónimo CRISPR (del inglés: "Clustered Regularly Interspaced Short Palyndromic Repeats"), propuesta que quedó recogida en una publicación de microbiólogos holandeses en 2002 y que sería utilizada universalmente desde entonces para referirse a estas secuencias. También, en la misma publicación, se describió por vez primera un conjunto de genes, algunos de los cuales codifican nucleasas o helicasas putativas, asociados a las secuencias repetidas CRISPR (los genes "cas" o "asociados a CRISPR:" del inglés: "CRISPR associated").


title: CRISPR

text: En 2005, tres grupos de investigación independientes mostraron que algunos de los espaciadores de los CRISPRs se derivan de diversas fuentes de ADN como ADN de fagos y ADN extracromosomal como los plásmidos. Nuevamente fue el grupo de Francisco J. Mojica quien primero se dio cuenta de que las secuencias CRISPR y los espaciadores asociados podían formar parte de algún sistema inmune propio de estos microorganismos procarióticos, quien primero estableció la relación entre CRISPR e inmunidad. Esas observaciones clave indican que el sistema CRISPR/cas puede tener un rol en la inmunidad adaptativa en las bacterias. Koonin y sus asociados propusieron que los espaciadores sirven como plantilla para moléculas de ARN, análogo a un sistema que usan los eucariontes llamado interferencia por ARN.


title: CRISPR

text: En 2007 Barrangou, Horvath (científicos de la industria alimenticia en Danisco) y el grupo de Moineau en la Université Laval (Canadá) mostraron que podían alterar la resistencia de "Streptococcus thermophilus" a ataques de fagos con ADN espaciador.


title: CRISPR

text: Jennifer Doudna y Emmanuelle Charpentier, ganadoras del Premio Nobel de Química 2020, junto con Francisco Juan Martínez Mojica, habían estado explorando de manera independiente a las proteínas asociadas a CRISPR para aprender cómo las bacterias utilizan a los espaciadores en sus sistemas inmunes. Juntas estudiaron un sistema CRISPR más simple que se basa en una proteína llamada Cas9. Encontraron que las bacterias responden ante un fago invasor al transcribir espaciadores y ADN palindrómico en una larga molécula de ARN y que entonces la célula utilizaba un ARN llamado "Trans-activating crRNA" (tracrRNA) y también Cas9 para cortarla en pedazos llamados ARNcr.


title: CRISPR

text: Cas9 es una nucleasa, una enzima especializada en cortar ADN, con dos sitios de corte activos (HNH y RuvC), uno para cada hebra de la doble hélice. El equipo demostró que podrían desactivar uno o ambos sitios preservando la habilidad de Cas9 de ser específico para su ADN objetivo. Jinek combinó al tracrRNA y ARN espaciador para formar una molécula llamada "single-guide RNA" que, al combinarse con Cas9, podía encontrar y cortar los blancos correctos de ADN. Jinek propuso que estos ARN guía sintéticos podrían usarse para la edición de genes.


title: CRISPR

text: La primera vez que se mostró que CRISPR funcionaba como una herramienta de ingeniería genética en cultivos de células humanas fue en 2012. Desde entonces se ha utilizado en muchos organismos, incluida la levadura del pan ("Saccharomyces cerevisiae"), el pez cebra ("Danio rerio"), la mosca de la fruta ("Drosophila melanogaster"), nematodos ("Caenorhabditis elegans") plantas y ratones, entre otros.


title: CRISPR

text: Adicionalmente, CRISPR ha sido modificada para hacer factores de transcripción programables que permiten a los científicos silenciar o activar ciertos genes.


title: CRISPR

text: Existen ahora librerías con decenas de miles de ARN guía.


title: CRISPR

text: La primera evidencia de que CRISPR puede revertir síntomas de enfermedad en organismos vivos fue demostrada en marzo de 2014, cuando investigadores del MIT curaron a ratones de desórdenes genéticos del hígado.


title: CRISPR

text: En 2015, la nucleasa Cpf1 se descubrió en el sistema CRISPR/Cpf1 de la bacteria "Francisella novicida". Cpf1 mostró varias diferencias claves de Cas9 incluyendo: causando un corte 'escalonado' en el ADN de doble hebra, en oposición al corte 'brusco' producido por Cas9, basándose en un PAM rico en T (proporcionando sitios de orientación alternativos a Cas9) y requiriendo solamente Un CRISPR ARN (CRRNA) para el éxito de la orientación. Por el contrario Cas9 requiere tanto crARN y un crARN trans activado (tracrRNA)).


title: CRISPR

text: Actualmente esta nucleasa recibe el nombre de Cas12a, y presenta algunas variantes en función del organismo de origen, entre las que se encuentran AsCas12a (presente en la bacteria "Acidaminococcus"), y LbCas12a (presente en "Lachnospiraceae bacterium"). Además, en esta última variante se descubrió una mutación puntual, D156R, que representa la sustitución del aminoácido ácido aspártico por arginina en la posición 156 de la proteína. Cas12a muestra un aumento en la eficiencia de corte en el modelo vegetal "Arabidopsis thaliana", similar al que después se corroboró en "D. melanogaster", generando una eficiencia en la tasa de edición génica próxima a la observada en Cas9.


title: CRISPR

text: Se trata de una nucleasa hipercompacta descrita en 2020 que representa la mitad del peso molecular de Cas9/Cas12 y con características similares en su utilización como herramienta para la edición génica. Además, se ha adaptado de forma exitosa a la edición "in vivo" en "Drosophila melanogaster" de forma precisa sin generar cortes en el ADN de doble cadena.


title: CRISPR

text: Al inicio de la década de los 2000, investigadores desarrollaron las nucleasas con dedos de zinc, proteínas sintéticas cuyas regiones de unión a ADN les permitían cortar el ADN en puntos específicos. Después, las nucleasas sintéticas llamadas TALENs dieron una vía más sencilla para llegar a ADN específico y se predijo que sobrepasarían a las de los dedos de zinc. Ambas dependen de la elaboración de proteínas específicas para cada ADN objetivo, un procedimiento bastante más complicado que los ARN guía. Los CRISPRs son más eficientes y pueden llegar a más genes que ambas técnicas.


title: CRISPR

text: El 12 de julio de 2017 la revista británica "Nature" comunicó un trabajo recibido el 22 de agosto de 2016, comunicando que investigadores de la Universidad de Harvard modificaron en el genoma de un grupo de bacterias, por medio de corta-pega o copipasteo genético logrado con la técnica CRISPR, la información digital de una fotografía y un GIF o animación corta. Después secuenciaron el ADN de los microorganismos para recuperar la imagen y el video con una precisión del 90%. El avance atrajo nuevo interés científico en el campo de la ‘grabación molecular’ y en particular conjeturas, al parecer prematuras e inexactas, sobre la memorización en sistemas accedidos desde un psiquismo.


title: CRISPR

text: Los loci de CRISPR van de 24 a 48 pares de bases. Las repeticiones están separadas por espaciadores de longitud similar. Algunas secuencias espaciadoras de CRISPR son complementarias a las de los plásmidos y fagos, aunque algunos espaciadores se complementan con el genoma procarionte (espaciadores autoreplicativos). Pueden añadirse rápidamente espaciadores nuevos como respuesta a una infección por un fago.


title: CRISPR

text: Los genes asociados a CRISPR, llamados "cas", son genes frecuentemente relacionados con los arreglos de repeticiones CRISPR. Análisis extensivos de genómica comparativa han identificado a muchos genes cas diferentes; un análisis inicial de 40 genomas de bacterias y arqueas sugirió que podría haber 45 familias de genes cas, con solo dos genes, cas1 y cas2, siendo omnipresentes. El sistema actual de clasificación de CRISPR agrupa a los operones en cas en tres grupos mayores, cada uno con múltiples subdivisiones basadas en filogenia de cas1 y en el complemento del operón del gen cas. Aparte de cas1 y cas2, las tres divisiones mayores tienen conjuntos muy diferentes de genes constitutivos, con cada una de las divisiones conteniendo un ‘gen característico’ encontrado exclusivamente en esa subdivisión. Muchos organismos contienen múltiples sistemas CRISPR-Cas sugiriendo que son compatibles e incluso podrían compartir elementos. La distribución esporádica de los subtipos de CRISPR/Cas sugiere que el sistema está sujeto a la transferencia genética horizontal durante la evolución microbiana.


title: CRISPR

text: Capturar al ADN invasor e integrarlo en un locus CRISPR en forma de un espaciador es la primera etapa en la respuesta inmune. La prevalencia de cas1 y cas2 fue la primera pista de que estaban involucrados en la adquisición de los espaciadores ya que todos los CRISPRs comparten la estructura repetitiva regular. Estudios de mutaciones confirmaron esta hipótesis ya que al remover cas1 o cas2 impedía la adquisición de espaciadores, sin afectar la respuesta inmune CRISPR en sí. La función exacta de Cas1 y Cas2 se desconoce, sin embargo un número de proteínas Cas1 se han caracterizado bioquímicamente y se han resuelto sus estructuras. Las proteínas Cas1 tienen secuencias de aminoácidos muy diversas, sin embargo sus estructuras cristalinas son sorprendentemente similares y todas las cas1 purificadas son nucleasas dependientes de metales que se unen a ADN en modo independiente de secuencia. Las proteínas Cas2 representativas también han sido caracterizadas y poseen actividad específica de endorribonucleasa ya sea para ARN de cadena sencilla o ADN de cadena doble Los datos funcionales y estudios de mutación genética sugieren que Cas1 y Cas2 cortan fragmentos de ADN invasor y los insertan en arreglos CRISPR.


title: CRISPR

text: El análisis bioinformático de regiones de genomas de fagos que fueron cortados como espaciadores (denominados protoespaciadores) reveló que estos no estaban distribuidos aleatoriamente sino más bien se encontraban adyacentes a secuencias cortas de ADN (de 3 a 5 pb) llamadas PAMs (protospacer adjacent motifs en inglés). El análisis de los sistemas CRISPR-Cas de las tres divisiones mayores han mostrado que los PAMs son importantes para los sistemas tipo I y II, pero no para el III durante el proceso de adquisición de espaciadores. En sistemas tipo I y II, los protoespaciadores se cortan en posiciones adyacentes a una secuencia PAM, con el otro extremo del espaciador siendo cortado con un mecanismo tipo regla inherente a la proteína Cas1, manteniendo así la regularidad en tamaño de los espaciadores a lo largo del arreglo de CRISPR. La conservación de la secuencia PAM difiere entre los sistemas CRISPR-Cas y parece estar ligada evolutivamente a cas1 y a la secuencia líder.


title: CRISPR

text: Los nuevos espaciadores se añaden a un arreglo de CRISPR en un modo direccional, ocurriendo preferencialmente pero no exclusivamente, en forma adyacente a la secuencia líder. El análisis del sistema tipo I-E de E. coli ha demostrado que la primera repetición directa, adyacente a la secuencia líder, es copiado, con el espaciador recientemente adquirido siendo insertado entre la primera y segunda repeticiones directas. La secuencia PAM también parece ser importante durante la inserción de espaciadores den sistemas tipo I-E. La secuencia PAM del sistema I-E contiene un nucleótido final fuertemente conservado (adyacente al primer nucleótido del protoespaciador) y se ha mostrado que este nucleótido se convierte en la base final en la primera repetición directa. Esto sugiere que la maquinaria de adquisición de espaciadores genera overhangs de cadena sencilla en la penúltima posición de la repetición directay en el PAM durante la inserción del espaciador. Sin embargo no todos los sistemas CRISPR-Cas parecen tener este mecanismo ya que los PAMs caracterizados en otros organismos no muestran el mismo nivel de conservación en la posición final. Es probable que en esos sistemas, un extremo romo es generado al final de la repetición directa y el protoespaciador durante la adquisición. Análisis reciente de CRISPRs de "Sulfolobus solfataricus" han revelado más complejidades al modelo canónico de la inserción de espaciadores ya que uno de sus seis locus insertó espaciadores de manera aleatoria a lo largo de su arreglo CRISPR, opuesto a una inserción más cercana a la secuencia líder.


title: CRISPR

text: Ha sido notado en una cantidad de CRISPRs que estos contienen muchos espaciadores para el mismo fago. El mecanismo que causa este fenómeno ha sido dilucidado recientemente en el sistema tipo I-E de E. coli. Una mejora significativa en la adquisición de espaciadores ha sido detectada donde ya hay espaciadores con el fago como objetivo inclusive con "desajustes" al protoespaciador. Este ‘cebado’ requiere que tanto las proteínas Cas involucradas en adquisición como en interferencia interactúen entre sí. Los espaciadores nuevamente adquiridos que resultan del mecanismo de cebado siempre se encuentran en la misma cadena que la del espaciador original que produjo el cebado. Esta observación ha llevado a la hipótesis de que la maquinaria de adquisición recorre el ADN extraño después del cebado para encontrar un nuevo protoespaciador.


title: CRISPR

text: La respuesta inmune por CRISPR ocurre en dos etapas: la biogénesis de CRISPR-ARN (ARNcr) y la interferencia guiada por ARNcr. Un arreglo de CRISPR es transcrito de un promotor en el líder en un solo transcrito largo. Este transcrito es procesado por cortes dentro de las secuencias repetidas para formar ARNcr. Los mecanismos para producir ARNcr maduros varían de gran manera entre los tres sistemas principales de CRISPR-Cas. Tanto en sistemas del tipo I-E como I-F las proteínas Cas6e y Cas6f respectivamente, reconocen giros creados por la naturaleza palindrómica de las repeticiones directas. Esas proteínas cortan el transcrito primario en la unión entre los ARN de cadena sencilla y doble, dejando un extremo 5ʹ de 8 nucleótidos originado de la repetición en los ARNcr maduros y con una secuencia espaciadora. Los sistemas tipo III también usan Cas6, sin embargo, sus repeticiones no producen girosstem-loops, sino que la escisión ocurre por el "enroscamiento" del transcrito primario a lo largo de la Cas6 para permitir la división justo antes de la secuencia de repetición. Los sistemas tipo II no poseen el gen Cas6 así que utilizan a la ARNsaIII para hacer los cortes. Los sistemas funcionales tipo II codifican un pequeño ARN adicional que es complementario a la secuencia de las repeticiones conocido como ARN trans-activador(tracrRNA). La transcripción del tracrRNA y del transcrito primario CRISPR resulta en emparejamiento de bases y la formación de ARN de doble cadena en la secuencia de repeticiones, la cual es subsecuentemente cortada por la ARNasaIII para producir ARNcr. A diferencia de los otros dos sistemas el ARNcr no contiene el espaciador completo, está truncado en un extremo por diez nucleótidos.


title: CRISPR

text: Los ARNcr se asocian con las proteínas Cas para formar complejos de ribonucleótidos que reconocen ácidos nucleicos extraños. Experimentos con fagos y plásmidos han indicado que los ARNcr no tienen preferencia por cadenas codificantes o no codificantes, lo cual indica un sistema específico para ADN guiado por ARN. El complejo tipo I-E (llamado Cascade de forma común) requiere cinco proteínas Cas arregladas en una configuración que recuerda a un caballo de mar, unidas al ARNcr de cadena sencilla que está unido a lo largo del "lomo". Durante el estado de interferencia en los sistemas tipo I la secuencia PAM es reconocida en la cadena complementaria al ARNcr y se requiere junto con el apareamiento de ARNcr. En los sistemas tipo I, el correcto emparejamiento entre el ARNcr y los protoespaciadores señaliza un cambio conformacional en Cascade que recluta a Cas3 para la degradación del ADN.


title: CRISPR

text: Los sistemas de tipo II utilizan una proteína multifuncional, Cas9, para el paso de interferencia. La Cas9 requiere tanto al ARNcr como al tracrRNA para funcionar y corta al ADN usando sus dominios duales de endonucleasa: HNH y RuvC. El apareamiento de bases entre el PAM y el genoma del fago también se requiere en los sistemas tipo II, sin embargo el PAM es reconocido en la misma cadena que el ARNcr (la cadena opuesta a los sistemas tipo I).


title: CRISPR

text: Los sistemas tipo III, como los de tipo I, requieren un complejo multiproteico para asociarse con el ARNcr. Análisis bioquímicos y estructurales de S. solfataricus y Pyrococcus furiosus han dilucidado que seis o siete proteínas cas se unen a los ARNcr, respectivamente. Sorpredentemente, los sistemas tipo III analizados en S. solfataricus y P. furiosus son específicos para el ARNm de fagos y plásmidos, lo cual puede hacer a esos sistemas capaces de ser específicos para genomas de fagos basados en ARN. El mecanismo para distinguir ADN propio del externo durante la interferencia está dentro de los ARNcr y por lo tanto se infiere que es conservado en los 3 sistemas. Aun a través del proceso de maduración distintiva de cada uno de los tipos, todos los ARNcr contienen una secuencia espaciadora y una porción de la repetición en uno o ambos extremos. Es la secuencia parcial de repeticiones la que previene que el sistema CRISPR-Cas ataque al cromosoma ya que el apareamiento de bases más allá de la secuencia del espaciador es una señal de que pertenece a sí mismo y previene el corte de ADN en el cromosoma. Las enzimas de CRISPR guiadas por ARN se clasifican como enzimas de restricción tipo V.


title: CRISPR

text: En 2017 se demostró en un estudio que este tipo de ingeniería genética puede generar centenares de mutaciones aleatorias no esperadas.


title: CRISPR

text: Dos días después de esta publicación, la reconocida revista Science publica un artículo que pone en entredicho la veracidad de este estudio crítico. Diferentes estudios anteriores muestran un alto nivel de especificidad de CRISPR.


title: CRISPR

text: Para la comprobación de estas mutaciones aleatorias o fuera de la región diana (""off targets"" en inglés) de las guías diseñadas han surgido herramientas de estudio de estas regiones de una forma automatizada como la herramienta VIVO. VIVO es un “sistema de detección in vivo de "off-targets"”. Esta herramienta es un método eficiente para la detección de las zonas de edición fuera de la región diana a la cual orientamos las guías RNA del sistema de edición genómica CRISPR /Cas. Actualmente es el único método que cuenta con una observación inicialmente in vitro de los posibles "off-targets" de las guías con una posterior comprobación in vivo de la acción real de las guías RNA. El sistema VIVO nos permite detectar y cuantificar las regiones fuera de la diana o ""target"" de las nucleasas, de esta forma se busca definir que generando una guía RNA bien diseñada esta carece de "off-targets" o mutaciones aleatorias.


title: CRISPR

text: El sistema VIVO se compone de dos etapas consecutivas:


title: CRISPR

text: a) CIRCLEseq : es un método in vitro para la determinación de los posibles "off-targets" que puede generar una RNA guía en unas células determinadas. Esta etapa se basa en la localización de regiones del DNA donde pueda producir un corte la Cas9 debido a que estas regiones son complementarias a los RNA guías diseñados. Esas regiones del DNA se cortan y se anillan, dando lugar a fragmentos circulares de DNA con regiones para el corte mediado por Cas9 y otras sin región reconocida por la Cas9 que se van a degradar mediante un tratamiento con exonucleasas. Los fragmentos circulares deseados se someten a una linealización mediante el uso de la Cas9 .Los fragmentos lineales adquieren un ligando adaptador, se someten a PCR y posteriormente se analizan mediante técnicas de secuenciación. Cada una de las secuencias obtenidas corresponderá a un posible "off-target" de la Cas9 mediante el uso de las guías diseñadas.


title: CRISPR

text: b) Comprobación in vivo: a partir de los datos obtenidos mediante CIRLCE seq se comprueba que realmente se produce un corte en esas regiones del DNA mediante la Cas9 in vivo .Para ello se utiliza un tejido al que se aplica las Cas9 y se observa si las regiones predichas por CIRCLE seq realmente se cortan por las nucleasas.


title: CRISPR

text: Estudios en "Streptococcus thermophilus" fueron los primeros indicativos de cómo los CRISPRs mueven a la evolución de fagos y bacterias. Un espaciador CRISPR debe corresponder perfectamente a la secuencia del gen objetivo del fago. Los fagos pueden seguir infectando a sus hospederos cuando hay mutaciones puntuales en el espaciador. Se siguen requerimientos similares en el PAM o la cepa seguirá siendo sensible a fagos. El modelo básico de evolución CRISPR se explica como el modelo donde los espaciadores recientemente incorporados llevan a los fagos a mutar sus genomas creando diversidad en las poblaciones tanto de fagos y bacterias.


title: CRISPR

text: La evolución CRISPR ha sido estudiada usando la genómica comparativa de muchas cepas de "S. thermophilus", "Escherichia coli" y "Salmonella enterica". Un estudio de 124 cepas de "S. thermophilus" mostró que 26% de todos los espaciadores eran únicos y que los diferentes locus de CRISPR mostraban diferentes tasas de adquisición de espaciadores. Los resultados mostraron que un locus de CRISPR particular puede evolucionar más rápidamente que otros, lo cual ayuda a establecer relaciones filogenéticas entre cepas. Un análisis similar de cepas de "E. coli" y "S. enterica" reveló que evolucionaron mucho más lentamente que "S. thermophilus". Las cepas de esta última que habían divergido hace más de 250,000 años todavía contenían el mismo complemento de espaciador.


title: CRISPR

text: La diversidad de CRISPR se estudió en múltiples comunidades ambientales usando metagenómica. El análisis de los biofilms de los drenajes ácidos de dos minas mostró que uno de los CRISPRs analizados contenía deleciones y espaciadores extensivos en comparación con el otro biofilm, lo cual sugiere una mayor actividad de fagos en una comunidad que en otra. En la cavidad oral, un estudio temporal determinó que aproximadamente del 7 al 22% de los espaciadores eran compartidos en períodos en el tiempo a lo largo de 17 meses en un mismo individuo y menos del 2% de los espaciadores fueron compartidos entre diferentes individuos en cualquier período en el tiempo. Del mismo ambiente, se aisló una cepa particular usando primers de PCR específicos para su CRISPR. A diferencia de los resultados generales de la presencia/ausencia de los espaciadores, los cuales mostraban diversidad significativa, este CRISPR añadió 3 espaciadores a lo largo de 17 meses, lo que sugiere que incluso en un ambiente con diversidad importante de CRISPR algunos locus evolucionan lentamente. Los CRISPRs también han sido analizados desde los metagenomas producidos por el proyecto del microbioma humano. Aunque la mayoría de los CRISPRs eran específicos en un sitio, algunos CRISPRs dentro del sitio eran ampliamente encontrados entre individuos. Uno de esos locus de CRISPR se originó con estudios de especies de Streptococcus y contuvieron ~15,000 espaciadores, 50% de los cuales eran únicos. De modo similar a los estudios dirigidos de la cavidad oral, algunos de los CRISPRs mostraron poca evolución entre períodos en el tiempo.


title: CRISPR

text: La evolución CRISPR ha sido estudiada en quimiostatos usando S. thermophilus para examinar de manera explícita la tasa de adquisición de espaciadores. En el período de una semana, cepas de "S. thermophilus" adquirieron hasta tres espaciadores cuando eran expuestos ante solo un fago. En el mismo periodo de tiempo, el fago desarrolló varios SNPs que se quedaron fijos es la población, lo que sugiere que CRISPR había prevenido la replicación de todos los otros tipos de fagos sin estas mutaciones. Otros experimentos, también con "S. thermophilus", mostraron que los fagos pueden infectar y replicarse en hospederos que tienen solo un espaciador y que los hospederos sensibles existen en ambientes con altas concentraciones de fagos. Los estudios por quimiostatos y observaciones en los CRISPRs sugieren muchas consecuencias al resultado de la evolución de CRISPR y fagos.


title: CRISPR

text: Los CRISPRs están altamente distribuidos entre bacterias y arqueas y muestran similitudes en las secuencias, sin embargo su característica principal son sus espaciadores repetidos y repeticiones directas. Esta característica hace a los CRISPRs fáciles de identificar en largas secuencias de ADN, ya que el número de copias repetidas disminuye la posibilidad de una unión tipo falso positivo. En la actualidad hay tres programas utilizados para la identificación de repeticiones CRISPR que buscan repeticiones interespaciadas en secuencias grandes: CRT, PILER-CR y CRISPRfinder.


title: CRISPR

text: El análisis de los CRISPRs en los datos de metagenómica es mucho más demandante, ya que los locus de CRISPR no suelen ensamblarse debido a su naturaleza repetitiva ni por variación de cepas, lo cual confunde a los algoritmos. Mientras que hay muchos genomas de referencias disponibles, la PCR se puede utilizar para amplificar arreglos de CRISPR y así analizar el contenido de los espaciadores. Sin embargo, este enfoque solamente dará información de CRISPRs específicamente buscados y en organismos con suficiente representación en bases de datos públicas para poder hacer el diseño de primers de PCR confiables.


title: CRISPR

text: El enfoque alterativo es extraer y reconstruir los arreglos de "CRISPR arrays" basándose en datos "shotgun" metagenómicos. La identificación de los arreglos de CRISPR de lecturas metagenómias es una tarea computacionalmente más difícil, particularmente con las tecnologías de secuenciación de segunda generación (como son 454, Illumina), ya que las longitudes cortas previenen que más de dos o tres unidades repetidas se presenten en una sola lectura. La identificación de CRISPR en lecturas crudas se logra usando puramente identificación denovo o al usar secuencias repetidas directas en arreglos CRISPR parcialmente ordenados como herramienta para identificar repeticiones directos en lecturas individuales.


title: CRISPR

text: Un estudio bioinformático mostró que los CRISPRs son evolutivamente conservados y que se pueden aglomerar en tipos relacionados. Muchos muestran la posibilidad de una estructura secundaria conservada.


title: CRISPR

text: A través del mecanismo CRISPR/Cas, las bacterias pueden adquirir inmunidad a ciertos fagos y por ende detener la consecuente transmisión de estos fagos. Por esta razón los CRISPR/Cas se describen como un mecanismo de herencia Lamarckiano. Otros han investigado la coevolución de los genomas vitales y hospederos.


title: CRISPR

text: Las proteínas Cas9 están altamente enriquecidas en bacterias patogénicas y comensales. La regulación mediada por CRISPR/Cas puede contribuir a la regulación de los genes endógenos bacterianos, particularmente en la interacción bacteriana con hospederos eucariontes. Por ejemplo, la proteína Cas9 de "Francisella novicida" usa un pequeño y único ARN asociado a CRISPR/Cas para reprimir un transcrito endógeno que codifica para una lipoproteína bacteriana que es crítica para "F. novicida" para reducir la respuesta del hospedero y promover la virulencia.


title: CRISPR

text: La prueba que demostró el principio de la redirección específica del sistema CRISPR/Cas llegó en 2012 y fue un primer paso para la materialización de propuestas para la biotecnología derivada de CRISPR:Editas Medicine, una "start up" de 43 millones de dólares, busca desarrollar tratamientos que usen CRISPR/Cas para hacer ediciones desde pares de bases específicas hasta segmentos más grandes de ADN. Algunas enfermedades heredadas como la fibrosis quística y la anemia son causadas por mutaciones de un solo par de bases; la tecnología CRISPR/Cas tiene el potencial de corregir esos errores. El gen "corregido" permanece en su lugar habitual en su cromosoma, quien contiene la forma en que la célula normalmente activa o inhibe su expresión.


title: CRISPR

text: Después de cultivar precursores de células sanguíneas llamados hemocitoblastos de la médula ósea de un paciente, la cirugía genética con CRISPR podría corregir el gen defectuoso. Entonces las células con el genoma corregido serían reintroducidas a la médula del paciente, que ahora producirá células sanas. Reemplazar el 70% de las células defectuosas significaría tener una cura. Antes de que pueda usarse clínicamente, la compañía debe poder garantizar que solo la región objetivo será afectada y debe determinar cómo entregar la terapia a las células del paciente. En 2014, investigadores de la UCSF usaron a los CRISPR para crear versiones sanas de células madre de pacientes con beta-talasemia. En 2020 la empresa CRISPR Therapeutics anunció que a junio de 2020, 5 pacientes con beta-talasemia, y dos pacientes con anemia falciforme, habían sido tratados exitosamente con CTX001. CTX001 es una terapia en desarrollo que las empresas Vertex Pharmaceuticals y CRISPR Therapeutics tienen en desarrollo. En la noticia se indicó que dos pacientes de beta-talasemia a los 5 y 15 meses después de la edición del gen que reprime la expresión del gen de la hemoglobina fetal (HbF) eran independientes de transfusiones; y que un paciente que presenta la enfermedad de células falciformes, o anemia falciforme, a los 9 meses de la edición CTX001 se presenta libre de las crisis vasooclusivas de la enfermedad.


title: CRISPR

text: Otras patologías que se podrían tratar con CRISPR incluyen la enfermedad de Huntington, los efectos de la vejez, esquizofrenia y autismo e inclusive la modificación de ADN en embriones vivos.


title: CRISPR

text: Mejorar el sistema de dirección es fundamental antes de que CRISPR pueda ser utilizado en aplicaciones médicas. Los ARN guía existentes podrían trabajar sobre secuencias que difieren en algunas pares de bases de la secuencia objetivo.


title: CRISPR

text: CRISPR simplifica la creación de modelos de ratones y reduce el tiempo requerido de meses a tan solo semanas. El "knockdown" de genes endógenos ha sido logrado por transfección con un plásmido que contiene un área CRISPR con un espaciador, que inhibe un gen objetivo. La inyección de cigotos de ratón con Cas9 y dos ARN guía pudo lograr desactivar dos genes con el 80% de eficacia. La llamada reparación dirigida por homología involucra el uso de Cas9 para "cortar" al ADN, y así introducir nuevas partes génicas al cigoto.


title: CRISPR

text: En 2014, el investigador chino Gao Caixia aplicó para patentes para la creación de una cepa de trigo que es resistente al oídio. A la cepa le faltan genes que producen proteínas que reprimen las defensas en contra del oídio. Los investigadores borraron todas las copias de los genes del genoma hexaploide del trigo. La cepa promete reducir o eliminar el gran uso de fungicidas para controlar la enfermedad. Gao usó los sistemas de edición génica "transcription activator-like effector nuclease" (TALENs) y CRISPR para agregar o cambiar ningún otro gen. Aún no ha habido pruebas de campo.


title: CRISPR

text: En las células diploides eucariotas los análisis de perdida de función se han realizado primariamente por siRNA. En cambio, en los últimos años la tecnología CRISPR asociada a la proteína Cas9 ha adquirido una gran importancia. El sistema CRISPR es eficiente identificando genes en la resistencia de fármacos, tumorogénesis, respuesta inmune, interacciones con patógenos e inmunoterapia para el cáncer. Un ejemplo de esto es el estudio realizado en "Bombyx mori" que identificó los genes relacionados con su viabilidad celular, crecimiento, interacciones huésped-patógeno y resistencia a la temperatura, caracterizando más de 6000 genes diferentes.


title: CRISPR

text: Marcadores moleculares como el estado epigenético, la accesibilidad a la cromatina, la vinculación de factores de transcripción y la conservación evolutiva, se correlacionan con elementos funcionales putativos en el genoma no codificante y pueden predecir su función reguladora. Sin embargo, estas predicciones superan en gran medida las regiones que carecen de características, y es difícil determinar qué características desempeñan un papel correlativo o verdaderamente causal en la función o en el fenotipo.


title: CRISPR

text: Los esfuerzos para determinar la causalidad se han basado en la utilización de fragmentos de ADN preseleccionados , basándose en su expresión como sustituto de la función, pero estos métodos carecen del contexto de la cromatina local y de las interacciones reguladoras más amplias. Por lo tanto, existe la necesidad de enfoques sistemáticos para cribar variantes no codificantes y determinar si y cómo afectan a los fenotipos en un contexto biológico nativo. Para ello, se diseñó un método de alto rendimiento que utilizaba una biblioteca de ARN guía en CRISPR-Cas9 para la detección genómica de locus no codificantes con el fin de identificar las regiones funcionales relacionadas con el fenotipo y la regulación de genes. En combinación con otros ensayos de todo el genoma, se demuestra el alto rendimiento de la técnica en la identificación de las regiones donde los cambios en el contexto de la cromatina y factores de transcripción que se unen a estas regiones están causalmente vinculados a la pérdida de expresión génica y un fenotipo relevante de la enfermedad.


title: CRISPR

text: Un ejemplo aplicado de esta técnica es la detección de localizaciones genómicas no codificantes que modulan la resistencia a los fármacos:


title: CRISPR

text: El Vemurafenib inhibe las proteínas B-Raf portadoras de la mutación (cambio de valina por glutamato en la posición 600), que se encuentra en el 50 al 70% de los melanomas. La resistencia al vemurafenib surge en cuestión de meses en casi todos los pacientes con melanoma, y las células tumorales supervivientes muestran un aumento de la malignidad que conduce rápidamente a la letalidad. Una criba de CRISPR a escala genómica encontró que las mutaciones de pérdida de función en los genes NF1, NF2 y CUL3 producen resistencia a vemurafenib. Para explorar si las mutaciones en las regiones no codificantes, alrededor de estos tres genes, podrían afectar de manera similar a la resistencia a los fármacos, se hizo uso de tres bibliotecas de "sgRNAs" que mapeaban a lo largo de 100kb en las regiones 5' y 3' de las principales isoformas de cada gen. Se concluyó que las mutaciones en la región no codificante 5' del gen CUL3 alteran los entornos locales epigenéticos y la interacción con distintos factores de transcripción ("yin yang 1" (YY1), "zinc finger protein 263" (ZNF263), "CCCTC-binding factor" (CTCF), y el complejo "activation-protein 1" (AP-1) formado por Jun:Fos). Estas regiones no codificantes son de alta importancia en la regulación de genes y la resistencia quimioterapéutica y farmacológica.


title: CRISPR

text: La técnica CRISPR y la edición génica podría tener un gran potencial en el campo de la tecnología de la reproducción humana. Por ejemplo, se podrían modificar mutaciones genéticas que puedan hacer peligrar la vida del individuo. Sin embargo, actualmente el uso de CRISPR y la edición genética en este campo aún está en proceso por asuntos de legalidad y bioéticos principalmente. No obstante, cabe destacar una noticia relevante en este campo: dos mellizas chinas fueron modificadas genéticamente mediante CRISPR para conseguir que fueran resistentes contra el VIH (virus causante del SIDA).


title: CRISPR

text: Los CRISPRs pueden agregar y eliminar pares de bases en locus de ADN altamente específicos. Se han usado los CRISPRs para cortar más de cinco genes a la vez.


title: CRISPR

text: Los "CRISPRi", análogos a los ARNi, tienen la capacidad de desactivar los genes en un modo reversible al ser específicos pero sin hacer cortes. En bacterias, la presencia es lo único que se necesita para detener la transcripción, pero en aplicaciones de mamíferos, una sección de proteína es añadida. Guía al ARN que es específico para el ADN regulatorio, que son promotores que preceden al gen de interés.


title: CRISPR

text: La Cas9 se usó para llevar factores de transcripción sintéticos (fragmentos proteicos que encienden genes) que activaban genes humanos específicos. Esta técnica logró un fuerte efecto al dirigir múltiples constructos de CRISPR a lugares ligeramente diferentes en el promotor del gen.


title: CRISPR

text: Los genes incluían algunos atados a enfermedades humanas, diferenciación muscular, cáncer, inflamación y de producción de hemoglobina fetal.


title: CRISPR

text: Otro mecanismo para la defensa de las bacterias contra invasión de fagos es teniendo islas genómicas. Un subtipo de islas llamada "phage-inducible chromosomal island" (PICI) es cortada del cromosoma bacteriano cuando se presenta la infección por fago y puede inhibir su replicación. Los mecanismos que inducen el sistema PICI y cómo PICI inhibe la replicación del fago no se tienen entendidos hasta ahora. Un estudio mostró que el fago lítico ICP1, el cual específicamente ataca al serotipo 01 de "Vibrio cholerae" ha adquirido un sistema CRISPR/Cas que apunta a un elemento de tipo PICI en "V. cholera". El sistema tiene dos locus CRISPR y 9 genes Cas. Parece ser que es homólogo al sistema 1-F system encontrado en "Yersinia pestis". Además, igual que el sistema bacteriano CRISPR/Cas el sistema ICP1 CRISPR/Cas puede adquirir nuevas secuencias, lo cual permite al fago co-evolucionar con su hospedador.


title: CRISPR

text: Existe software gratuito para diseñar ARN para poder identificar cualquier gen deseado. El repositorio de Addgene ofrece a los académicos la posibilidad de crear su propio sistema ”CRISPR system" por 65 dólares. En 2013 Addgene distribuyó más de 10 000 constructos de CRISPR. La asociación ha recibido secuencias génicas activadoras de CRISPR de 11 equipos de investigación independientes.


title: CRISPR

text: Hasta diciembre de 2014, los derechos sobre la patente de CRISPR están impugnados. Una aplicación de patente provisional sobre el uso del sistema CRISPR para la edición de genes y regulación de expresión génica fue solicitada por el equipo de Doudna el 12 de mayo de 2012. Aplicaciones subsecuentes fueron combinadas el 6 de marzo de 2014, con los resultados siendo publicados por la oficina de patentes estadounidense (USPTO). Los derechos de patente han sido asignados por los inventores a los regentes de la Universidad de California y la Universidad de Viena.


title: CRISPR

text: Por su parte, Feng Zhang en el Broad Institute, que había desarrollado y demostrado la tecnología CRISPR en células humanas, ha obtenido una patente de CRISPR para células con núcleo: células de animales (incluidos los humanos) y de plantas. Según Zhang, las predicciones formuladas por Doudna en su propia aplicación de patente de que su descubrimiento podría funcionar en humanos fueron una "mera conjetura", mientras que él fue el primero en demostrarlo en un acto de invención separado y "sorprendente". Esta segunda patente es controvertida, ya que otros científicos sugieren que, en términos de propiedad intelectual, era "obvio" que la tecnología CRISPR funcionaría en células humanas y por tanto la "invención de Zhang no sería merecedora de una patente propia. Desde diciembre de 2014 se espera que Doudna y Charpentier planteen su oposición contra la patente del Broad Institute.


title: CRISPR

text: En febrero de 2017, la Oficina de Patentes de los Estados Unidos se pronunció sobre un caso de interferencia de patente presentado por la Universidad de California con respecto a las patentes emitidas al Broad Institute, y encontró que las patentes Broad, con reivindicaciones que abarcaban la aplicación de CRISPR/cas9 en células eucariotas, eran distintas de los inventos reclamados por la Universidad de California.


title: CRISPR

text: Hasta noviembre de 2013, SAGE Labs (ahora parte del grupo Horizon Discovery) tenía derechos exclusivos de una de esas empresas para producir y vender ratas genéticamente modificadas y derechos no exclusivos para modelos de ratones y conejos. En 2015, Thermo Fisher Scientific había autorizado la propiedad intelectual de ToolGen para desarrollar kits de reactivos CRISPR.


title: CRISPR

text: Hay que aclarar que el sistema CRISPR fue descubierto por primera vez, por un grupo de científicos japoneses en 1987 liderado por Yoshizumi Ishino, años después fue encontrado de nuevo de forma independiente por el microbiólogo alicantino Francis Mojica, actual profesor titular de la Universidad de Alicante.


title: CRISPR

text: Según investigadores del Instituto Wellcome Sanger en Inglaterra, la edición genética puede llevar a mutaciones no directamente relacionadas con el sitio de edición del genoma. La complejidad y la interrelación entre genes editados y no editados podría afectar a la salud de personas con genes editados. En su monografía "El fenotipo revolucionario" ("The revolutionary phenotype"), el neurólogo canadiense Jean-François Gariépy desarrolla una teoría basada en la Hipótesis del mundo de ARN en que la edición del genoma humano podría llegar a un reemplazo de la reproducción biológica. En lugar de la presente reproducción biológica, podría formarse una reproducción controlada por científicos usando programas informáticos para cumplir los deseos de los padres eligiendo una edición genética para sus hijos.


title: Planicie del río Snake

text: La planicie del río Snake es una llanura ubicada en su mayor parte dentro del estado de Idaho, en los Estados Unidos. Se extiende alrededor de 400 millas (640 km) hacia el oeste, desde el noroeste del estado de Wyoming hasta el límite entre Idaho y Oregón. La planicie es una depresión ancha y llana en forma de arco y cubre aproximadamente una cuarta parte de Idaho. Tres grandes buttes volcánicos sobresalen en la llanura al este de Arco, el más grande es Big Southern Butte.


title: Planicie del río Snake

text: La mayoría de las principales ciudades de Idaho se encuentran en la planicie del río Snake, al igual que gran parte de su tierra agrícola.


title: Planicie del río Snake

text: La planicie del río Snake se puede dividir en tres sectores: occidental, central y oriental. El sector occidental es un gran valle tectónico o rift cubierto por varios kilómetros de sedimentos lacustres; los sedimentos yacen sobre estratos de riolita y basalto y están cubiertos por basalto. La región occidental tiene una antigüedad estimada en alrededor de 11 a 12 Ma y fue formada con la erupción de lavas riolíticas e ignimbritas. La llanura occidental no es paralela al movimiento de la placa norteamericana y su morfología es similar a otras mesetas volcánicas como el Grupo Chilcotin en el centro-sur de Columbia Británica, Canadá.


title: Planicie del río Snake

text: La planicie oriental del río Snake sigue la trayectoria de la placa norteamericana sobre el punto caliente de Yellowstone, actualmente ubicado hacia el centro del parque nacional de Yellowstone. La llanura oriental es una depresión topográfica que atraviesa las estructuras montañosas del distrito geológico Basin and Range, más o menos paralelas al movimiento de la placa norteamericana. Está sustentada casi en su totalidad por el basalto que brotó de los grandes volcanes de escudo. Debajo de los basaltos se encuentran las lavas riolíticas y las ignimbritas que erupcionaron cuando la litosfera pasó por encima del punto caliente.


title: Planicie del río Snake

text: La llanura central del río Snake es similar a la llanura oriental, pero difiere por tener secciones de sedimentos lacustres y fluviales intercalados, incluidos los lechos fósiles de Hagerman.


title: Planicie del río Snake

text: Las calderas de Island Park y Yellowstone se formaron como resultado de enormes erupciones de ignimbrita y riolita, con erupciones individuales de hasta 600 millas cúbicas ( km³) de cenizas.


title: Planicie del río Snake

text: La caldera de Henry's Fork, que mide 18 millas (29 km) por 23 millas (37 km), puede ser la caldera simétrica más grande del mundo. Se formó cuando un domo de magma se acumuló y luego se escurrió. El centro del domo colapsó, dejando una caldera.


title: Planicie del río Snake

text: La caldera de Henry's Fork es una de las más antiguas y extensas de Island Park. Sus dimensiones se estiman en 50 millas (80 km) por 65 millas (105 km), aproximadamente. Volcanes más jóvenes que entraron en erupción al pasar sobre el punto caliente cubrieron en algunos lugares la llanura con flujos de lava basáltica, incluido el Monumento Nacional Craters of the Moon ("Cráteres de la Luna").


title: Planicie del río Snake

text: La planicie del río Snake tiene un efecto significativo en el clima del parque nacional de Yellowstone y las áreas adyacentes al sur y al oeste de Yellowstone. Con el paso del tiempo, el punto caliente de Yellowstone dejó una separación de unas 70 millas (110 km) de ancho a través de las Montañas Rocosas. Este "corredor" está alineado con la brecha entre la cordillera de las Cascadas y la Sierra Nevada. El resultado es un "canal de humedad" que se extiende desde el Océano Pacífico hasta Yellowstone. La humedad del Océano Pacífico fluye hacia el interior del continente en forma de nubes y aire húmedo. Pasa a través de la brecha entre la Sierra Nevada y la cordillera de las Cascadas hacia el interior de la llanura del río Snake, donde se canaliza a través de las Montañas Rocosas, sin mesetas ni cadenas montañosas que impidan su avance.  Finalmente encuentra condiciones de pendiente ascendente en la cabecera del Valle del Río Snake en Ashton (Idaho), y en Island Park (Idaho), en la cordillera Teton al este de Driggs (Idaho), y en la Meseta Yellowstone del parque nacional Yellowstone, donde el enfriamiento producto de la mayor altura hace que la humedad del aire se precipite en forma de lluvia o nieve.


title: Planicie del río Snake

text: El resultado es un clima localizado en la vertiente oriental de las Rocosas similar al clima en la ladera occidental de la cordillera de las Cascadas o la región norte de la Sierra Nevada. La cabecera del valle del Río Snake, los Tetons y la Meseta de Yellowstone reciben mucha más precipitación que otras áreas de la región, y el área se caracteriza por ser húmeda, tener abundante vegetación, numerosos arroyos y gran cantidad de nieve en invierno.


title: Planicie del río Snake

text: Aunque la topografía de la planicie no ha cambiado en gran medida durante varios millones de años, el clima de esta región no ha sido tan constante. Las condiciones climáticas actuales comenzaron a caracterizar la región en el Pleistoceno temprano (hace aproximadamente 2,5 millones de años). Sin embargo, el clima árido de hoy es la consecuencia de la modificación gradual de un clima definido por una mayor humedad y rangos más estrechos de temperaturas anuales.


title: Philippe-Auguste Jeanron

text: Philippe-Auguste Jeanron (Boulogne-sur-Mer, 10 de mayo de 1808 - Castillo de Comborn, Orgnac-sur-Vézère, 8 de abril de 1877) fue un pintor y crítico francés.


title: Philippe-Auguste Jeanron

text: Discípulo de François Souchon y de Xavier Sigalon, expuso en 1831 sus primeras obras "Los pequeños patriotas" y un "Retrato", y hasta 1838 continuó cultivando la pintura de género, pero a partir de dicha fecha comenzó a dedicarse al paisaje. Al mismo tiempo se ocupaba también de crítica artística, y en 1848 fue nombrado director de los Museos nacionales, puesto que conservó hasta 1850. En este cargo mostró tanta inteligencia como actividad, pues fundó la exposición libre y protegió a artistas desdeñados entonces y que alcanzaron luego merecida fama. Además consiguió que la Asamblea Constituyente votase la cantidad de 2000 francos para decorar la Galería de Apolo y reparar otras del Louvre, encargando a Delacroix el plafón principal.


title: Philippe-Auguste Jeanron

text: También tradujo y comentó la "Vida de los pintores, "de Vasari, y publicó numerosas críticas artísticas en diversos periódicos y revistas"."


title: Won Bin

text: Won Bin (; seudónimo de Kim Do Jin, ; Jeongseon, Provincia de Gangwon, Corea del Sur, 10 de noviembre de 1977) es un actor surcoreano, conocido por sus papeles en series de televisión y largometrajes como "Otoño en mi corazón" (2000), "Taegukgi" (2004), "Madeo" (2009) y "El hombre sin pasado" (2010).


title: Won Bin

text: Won nació en Jeongseon en Gangwon-do, Corea del sur. Es el quinto hijo de un matrimonio, tiene un hermano y tres hermanas. Su padre era empleado en una mina y su madre trabajaba en una granja, actualmente ambos están jubilados. Como es común en los niños que viven en las regiones montañosas, Won pasó la mayor parte de su juventud jugando con amigos en las montañas y ríos de alrededor, más tarde explicó "La mayoría de las noches volvía a casa al atardecer con la cara negra y polvorienta." Es considerado frecuentemente tímido, introspectivo y tranquilo, estos rasgos le acompañan hasta la actualidad. A pesar de no ser hablador o extrovertido, destacó en los deportes. Won dio clases de taekwondo y actualmente es cinturón negro. En su juventud, pensó en ser mecánico de coches por su interés en carreras de coches y motos. Won se graduó en mecánica en el instituto.


title: Won Bin

text: En noviembre de 1995, una cadena de televisión por cable estaba buscando y contratando nuevos actores; Won se presentó y fue aceptado durante su último semestre en el instituto. Comenzó a tomar clases de actuación en las oficinas de la cadena y apareció en varias series de televisión. El mes siguiente, Won formó un contrato con una agencia de talentos.


title: Won Bin

text: Won hizo su debut en pantalla coon un papel secundario en la serie de 1997 "Propose." Su papel en "Ready Go!" (1998) le ayudó a pulir sus habilidades en la actuación. Después de "Ready Go!, "se tomó un descanso y entró en la escuela Paekche Institute of the Arts para recibir clases de actuación. En 1999 Won apareció en la pequeña pantalla con un papel protagonista en la serie "Kwangki "por el que fue reconocido como joven promesa de la actuación.


title: Won Bin

text: Hizo su gran aparición en el año 2000 con las series "Kkokji" y "Otoño en mi corazón." Su papel como hijo rebelde en Kkokji probó su potencial y su papel en la exitosa serie Otoño en mi corazón le catapultaron a la lista A de intérpretes en Corea. "Otoño en mi corazón "se emitió con éxito en Asia y le convirtió en una de los actores más populares no sólo de Corea sino de Asia. En el año 2002, Won participó en la primera producción conjunta de Corea del Sur y Japón, la serie "Friends".


title: Won Bin

text: Además Won ha participado en varias películas incluyendo Guns&talks y My brother, pero es su retrato del hermano pequeño en la película bélica "Taegukgi" (2004) lo que le catapultó a la escena internacional. "Taegukgi "fue la película más taquillera en Corea del Sur el año 2004 con 11.75 entradas vendidas.


title: Won Bin

text: Su carrera se vio interrumpida por el servicio militar obligatorio surcoreano. Después de graduarse en la Escuela de Artes de la Universidad de Yong-In en 2005, Won comenzó su servicio militar en noviembre de 2005 en un puesto en la Zona Desmilitarizada, puesto para el que se ofreció voluntario. El 2 de junio de 2006, el ejército confirmó que Won Bin ya no era soldado activo. Esta decisión fue tomada por el ejército cuando Won Bin se hirió el LCA, fue oficialmente licenciado el 7 de junio de 2006. Tras la cirugía pasó un año en un programa de rehabilitación para recuperarse.


title: Won Bin

text: Won fue nombrado embajador de buena voluntad de UNICEF el 6 de septiembre de 2007. Ha participado en varios programas y eventos de calidad en Corea para UNICEF desde entonces, ha aparecido en varios vídeos publicitarios.


title: Won Bin

text: En abril de 2008, Won confirmó su participación en la película "Madeo" dirigida por Bong Joon-ho. La filmación comenzó en septiembre de 2008 y terminó en febrero de 2009. La película fue seleccionada para competir en la sección Un Certain Regard del Festival de Cine de Cannes en 2009. Apareció en el estreno mundial de la película el 16 de mayo de 2009 en la alfombra roja del Festival de Cine de Cannes. En agosto de 2010 estrenó la película El hombre sin pasado.


title: Castnia eudesmia

text: La mariposa del chagual (Castnia eudesmia) es una especie de mariposa nativa de la zona costera del norte y centro de Chile, siendo la mariposa más grande de ese país con una envergadura de 7 cm en los machos y hasta 11 cm en las hembras.


title: Castnia eudesmia

text: Las alas anteriores son de color gris oscuro, con dos bandas blancuzcas; las posteriores presentan el área discal muy oscura con manchas rojizas en los márgens exteriores.


title: Castnia eudesmia

text: Tiene un interesante ciclo de vida: una vez que se han apareado, las hembras vuelan hacia las plantas conocidas vulgarmente como chaguales o puyas (género "Puya", principalmente "Puya chilensis"). Depositan sus huevos en la base de estas plantas. Al eclosionar, sus larvas se desarrollan subsistiendo de esta planta. Pueden pasar como orugas uno o dos años dependiendo de que tan rápido sea su desarrollo, entonces harán una galería en el interior del tallo de la puya hecha con corteza y desechos, y dentro de la galería se envolverán en seda para realizar la metamorfosis de la que emergerán luego como mariposas adultas. Lamentablemente esta hermosa mariposa se encuentra en peligro de extinción.


title: Philip Stone

text: Philip Stone (Kirkstall, Leeds, Yorkshire del Oeste; 14 de abril de 1924-Londres, 15 de junio de 2003), de nombre real Philip Stones, fue un actor británico de cine y televisión. Sus trabajos más destacables son tres papeles en películas consecutivas de Stanley Kubrick: el padre de Alex en "A Clockwork Orange" (); el abogado de la familia Lyndon, llamado Graham, en "Barry Lyndon" (); y Delbert Grady, el guarda original del hotel, en "The Shining" (). Es el único actor, además de Joe Turkel, que aparece en tres filmes de Kubrick.


title: Philip Stone

text: Stone nació en Kirkstall, un barrio de la ciudad de Leeds. Sirvió en la Royal Air Force durante la Segunda Guerra Mundial, y su primer trabajo fue en una empresa de ingeniería en Leeds. En 1947 contrajo la tuberculosis, que le mantuvo alejado del trabajo durante varios años para recibir tratamiento. Estuvo casado desde 1953 con Margaret Pickford, hasta la muerte de ella en 1984. El matrimonio tuvo tres hijos.


title: Colección de Campanas Quintana

text: La colección de Campanas Quintana es un museo que se encuentra en Urueña, un municipio y localidad situada en la provincia de Valladolid. La colección fue cedida por el fundidor Manuel Quintana Saguillo, natural de Saldaña (Palencia) y contiene una veintena de campanas de distintos tamaños y tipos. Las piezas se sitúan cronológicamente entre los siglos XV y XX.


title: Colección de Campanas Quintana

text: El museo de campanas Quintana abre sus puertas de martes a sábado de 11:30 a 13:30 horas y de 17:30 a 19:30. Los domingos de 11:00 a 13:00.


title: Colección de Campanas Quintana

text: Los lunes y festivos permanece cerrado.


title: Hermanos Koch

text: Los hermanos Koch son célebres por ser los propietarios a partes iguales de Koch Industries, la segunda mayor empresa privada de los Estados Unidos. Forman parte de la acaudalada familia Koch. Los hermanos son:


title: Park Kyung-Suk

text: Park Kyung-Suk es una deportista surcoreana que compitió en taekwondo. Ganó dos medallas en el Campeonato Mundial de Taekwondo en los años 1993 y 1995.


title: Sheila Raynor

text: Sheila Raynor (15 de marzo de 1906 - 17 de febrero de 1998) fue una actriz británica. Uno de sus papeles notables fue el de la madre de Alex (Malcolm McDowell) en "A Clockwork Orange".


title: Laelia furfuracea

text: Laelia furfuracea es una especie de planta epifita que pertenece a la familia de las orchidaceae. Es originaria de México (Oaxaca). Es una orquídea de tamaño medio, con hábitos de epífita con un 3 nudos, pseudobulbos ligeramente acanalado-cónicos ovoides con una solitaria hoja [raramente 2], apical, erecta, lanceolada, carnosa y aguda. Florece en el otoño hasta mediados de invierno en una inflorescencia delgada, corta de 15 a 30 cm de longitud, en un arqueado racimo con 3 a 5 flores de larga vida, fragantes y de colores variables.


title: Laelia furfuracea

text: Se encuentra en estado de Oaxaca del sur de México de tamaño medio en las elevaciones de 2100-3000 metros en la áspera corteza de robles achaparrados. Esta especie necesita montarse en un corcho o helecho arborescente, alta humedad durante todo el año, y es necesario un reposo invernal decidido con la luz brillante después de que el crecimiento ha madurado. "Laelia furfuracea" fue descrita por John Lindley y publicado en "Edwards's Botanical Register" 25: t. 26. 1839. Laelia: nombre genérico que ha sido nombrado por "Laelia", una de las vírgenes vestales, o por el nombre romano de "Laelius", perteneciente a una antigua familia romana.


title: Laelia furfuracea

text: furfuracea: epíteto latíno que significa "como grano o salvado"


title: PAFAH2

text: Acetilhidrolasa del factor activador de plaquetas 2 ("platelet-activating factor acetylhydrolase 2") es una isoforma de enzima de 40KD que está codificada por el gen PAFAH situado en el cromosoma 1 humano cuya función enzimática cataliza la eliminación del grupo acetilo en la posición sn-2 del factor activador de plaquetas.


title: PAFAH2

text: Información en las bases de datos:


title: Novela gótica estadounidense

text: La narrativa gótica estadounidense es un género literario perteneciente a la narrativa gótica. Los elementos específicos del gótico estadounidense son: lo racional vs lo irracional, el puritanismo, la culpa, la tenebrosidad o lo tétrico (Das Unheimliche); definido por Sigmund Freud como la rareza en las cosas comunes, , fantasmas, monstruos y la degradación interna. Los orígenes de estos conceptos se hallan en un pasado lleno de esclavitud, miedo a una mezcla racial (mestizaje), relaciones adversas con los nativos americanos, su posterior genocidio, y la desoladora zona salvaje en la frontera americana. La narrativa gótica americana normalmente no incluye ni castillos ni objetos que aludan a la historia de la civilización. La diferenciación entre horror y terror es importante en el estudio de estos textos:


title: Museo Taurino Emilio Casares Herrero

text: El museo Taurino Emilio Casares Herrero se encuentra en Viana de Cega, un municipio y localidad situada en la provincia de Valladolid. Este centro consta de tres salas. En la primera se encuentra la biblioteca, en la segunda la hemeroteca y en la tercera y última sala, la cartelería.


title: Museo Taurino Emilio Casares Herrero

text: En la hemeroteca se hallan numerosas publicaciones referidas tanto a España como a otros países europeos (Portugal y Francia).


title: Museo Taurino Emilio Casares Herrero

text: En la cartelería se pueden encontrar numerosos carteles superando los 5.000 ejemplares ordenados y clasificados en murales y escaparates. Todos están colocados alfabéticamente y colocados de manera que atienden a las características locales.


title: Corazón de tiza

text: «Corazón de tiza» es una canción del grupo de pop-rock español Radio Futura publicada en 1990, incluido en su último álbum de estudio "Veneno en la piel".


title: Corazón de tiza

text: Aunque en ocasiones se ha criticado la falta de originalidad del tema, se trata de uno de los últimos grandes éxitos del grupo madrileño antes de su disolución, llegando a alcanzar el puesto número 7 en la lista de los más vendidos confeccionada por AFYVE.


title: Corazón de tiza

text: La canción llegó a ser número uno de la lista de Los 40 Principales la semana del 18 de agosto de 1990.


title: Corazón de tiza

text: La canción fue versionada por Rosario Flores para el álbum homenaje a Radio Futura "Arde la calle", publicado en 2004.


title: Corazón de tiza

text: Existe también una versión del grupo infantil Bom Bom Chip, grabada en 1992.


title: Fortaleza de Nueva Orshova

text: La Fortaleza de Nueva Orshova fue una obra fortificada construida por el ingeniero de origen suizo Nicolaus Doxat de Demoret (1682-1738), generalfeldmarschall de Austria, en una isla del Danubio ya desaparecida, Ada-Galéh, cuya situación la hacía dueña de la navegación del citado río.


title: Fortaleza de Nueva Orshova

text: Ernesto Gedeón von Laudon tras visitar los territorios ganados en la guerra austro-turca y repartir las tropas, mandó al general Vantersleben que con las fuerzas del banato de Temeswar emprendiese el sitio de la fortaleza de nueva Orshova situada en la isleta del Danubio:


title: Fortaleza de Nueva Orshova

text: El banato de Temeswar se hallaba situado en el Sur de Hungría, limítrofe con la Transilvania y por los grandes ríos del "Marosch", el Theyss] y el Danubio.


title: Fortaleza de Nueva Orshova

text: Fuentes Bibliografía complementaria


title: Laelia gouldiana

text: Laelia gouldiana es una especie de planta epifita que pertenece a la familia de las orchidaceae. Es originaria de México (Estado de Hidalgo).


title: Laelia gouldiana

text: Es una orquídea de tamaño pequeño a mediano, con hábitos de epífita con pseudobulbos fusiformes algo comprimidos envueltos basalmente por 4-6 vainas escariosas y llevando de 2 a 3 hojas, erectas, lanceoladas, de color verde brillante. Está extinta en la naturaleza y tal vez es la mejor de la "Laelias mexicanas". Florece en una inflorescencia apical, erecta que surge en el otoño y mide 75 cm y lleva hasta 10 flores magenta bien redondeadas de 7,5 cm, floraciones que son impresionantes, como el labio es violeta / rojo con un centro blanco y rojo veteado y una quilla amarilla, ligeramente perfumada, crece tan fácilmente como "Laelia anceps" todos en el otoño e invierno. Se encuentra en el estado de Hidalgo de México en las montañas a elevaciones alrededor de 1.550 metros.  "Laelia gouldiana" fue descrita por Heinrich Gustav Reichenbach y publicado en "". ser. 3 3: 41. 1888. Laelia: nombre genérico que ha sido nombrado por "Laelia", una de las vírgenes vestales, o por el nombre romano de "Laelius", perteneciente a una antigua familia romana.


title: Laelia gouldiana

text: gouldiana: epíteto otorgado en honor del botánico Frank Walton Gould (1913 - 1981)


title: César Edwin Martínez Correa

text: Cesar Edwin Martinez Correa (1 de noviembre de 1970, Líbano (Tolima), Colombia) es un cirujano plástico y director en la "Unidad Medico Quirúrgica de Cirugía Plástica Ambulatoria" en la Ciudad de Ibagué


title: César Edwin Martínez Correa

text: Egresado de la Universidad de Caldas en donde obtuvo el título de Médico Cirujano. Realizó una especialización en Cirugía Plástica, Estética y Reparadora en Buenos Aires- Argentina (Resolución 1553/04 Ministerio de Educación Nacional) en la Clínica Juri de Cirugía Plástica. En el año 2004, en Brasil, realizó diferentes rotaciones como Fellow en la Clínica Ivo Pitanguyy también con el doctor Ronaldo Pontes. En el año 2012 y 2013 realizó una sub-especialización en Técnicas Oncoplásticas y Reconstructivas de la Mama en el Complexo Hospitalario Universitario de A Coruña- España. Asimismo estudio en la Escuela de Microcirugía Argentina con el apoyo de la Universidad Católica Argentina.


title: César Edwin Martínez Correa

text: Al día de hoy, el doctor César Martínez asistió a numerosos congresos, simposios y cursos de actualización en Cirugía Plástica ofrecidos por la Sociedad Colombiana de Cirugía Plástica y la Federación Ibero Latinoamericana de Cirugía Plástica y Reconstructiva FILACP. Se desempeñó como docente Catedrático en la Facultad de Ciencias Médicas de la Universidad del Tolima por doce años, y forma parte como miembro activo de la Fundación Itachue. Con dicha fundación ha realizado cirugías plásticas a personas con condiciones físicas especiales, corrección de defectos faciales y corporales, tratamientos con obesos mórbidos y cirugías de corrección de cicatrices en población desfavorecida. Actualmente, el doctor Martínez es el presidente de la Academia Colombiana de Cirugía Plástica Reconstructiva Estética. Los miembros de esta organización requieren como prerrequisito ser Médicos con Especialización en Cirugía Plástica. El Cirujano es igualmente miembro de la Junta de la Liga Contra el Cáncer en el Tolima. Dirige su propia Unidad Quirúrgica de Cirugía Plástica en Ibagué.


title: Destilación flash

text: La destilación flash es un tipo de operación unitaria que ocurre cuando un líquido saturado se escinde en un tanque a menor presión en dos estados, un vapor y un líquido.


title: Destilación flash

text: Si el líquido saturado es de dos o más componentes (por ejemplo una mezcla de propanol/isobutano o etanol/agua), el vapor producido tras las escisión se encuentra enriquecido en el componente más volátil que el líquido remanente.


title: Destilación flash

text: Para una correcta destilación flash, la temperatura y presión dentro del tanque ha de ser tal que se consigan dos componentes, un líquido y un vapor. Para ello usaremos una línea o recta de operación con valores -"f"/"v" entre 0,3 y 0,7, es decir que la pendiente de la recta de operación no sea ni totalmente vertical ni horizontal para que haya cantidades significativas tanto del líquido como del vapor.


title: Destilación flash

text: Antes de introducir el líquido en el flash se suele calentar y para aumentar su presión y temperatura para poder producir la escisión dentro del tanque a la presión y temperatura deseadas.


title: Destilación flash

text: La destilación flash de un solo componente es un proceso isoentálpico, normalmente adiabático. La siguiente ecuación deriva de un balance simple de energía, realizado a la válvula de entrada, que predice cuánto líquido del monocomponente es vaporizado:


Destilación flash


title: Pseudospingus verticalis

text: El hemispingo cabecinegro (en Ecuador) (Pseudospingus verticalis), también denominado frutero de cabeza negra, hemispingus tiznado (en Colombia), buscador cabecinegro (en Venezuela) o hemispingo de cabeza negra (en Perú), es una especie de ave paseriforme de la familia Thraupidae, una de las dos pertenecientes al género "Pseudospingus", anteriormente situada en "Hemispingus". Es nativo de regiones andina del noroeste de América del Sur.


title: Pseudospingus verticalis

text: Se distribuye de forma discontinua por la cordillera de los Andes en el oeste de Venezuela (sur de Táchira), Colombia (al oeste en Antioquia, al centro, al sur hasta Nariño, y al este en Cundinamarca), Ecuador (pendiente oriental en Carchi, Napo y Zamora-Chinchipe) y norte del Perú (Piura, cerca de la divisa Piura–Cajamarca).


title: Pseudospingus verticalis

text: Esta especie es considerada poco común en sus hábitats naturales; el dosel y los bordes de bosques montanos húmedos de altitud, principalmente entre los 2700 y los 3400 msnm. Es más numeroso cerca de la línea de árboles.


title: Pseudospingus verticalis

text: La especie "P. verticalis" fue descrita por primera vez por el ornitólogo francés Frédéric de Lafresnaye en 1840 bajo el nombre científico "Nemosia verticalis"; su localidad tipo es: «Santa Fe de Bogotá, Colombia».


title: Pseudospingus verticalis

text: El término genérico masculino "Pseudospingus" se construye con palabras en el idioma griego «"pseudos"» que significa falso, otro, y «σπιγγος "spingos"», que es el nombre común del pinzón vulgar ("Fringilla coelebs"), vocablo comúnmente utilizado en ornitología cuando se crea un nombre de un ave que es parecida a un pinzón; y el nombre de la especie «"verticalis"» del latín moderno y significa: coronado.


title: Pseudospingus verticalis

text: Las presente especie y "Pseudospingus xanthophthalmus" fueron tradicionalmente incluidas en el género "Hemispingus", hasta que en los años 2010, diversos estudios genéticos, permitieron comprobar que las dos especies eran hermanas y formaban un clado separado del género que integraban. Con base en estos resultados, se decidió recuperar de la sinonimia de "Hemispingus" al género "Pseudospingus" y rehabilitarlo, para así ubicar esas dos especies en él. El Comité de Clasificación de Sudamérica (SACC) en la Propuesta N° 730 parte 07 aprobó esta modificación taxonómica.


title: Pseudospingus verticalis

text: Es monotípica.


title: Jonathan Saltos

text: Jonathan Saltos (Chone, Ecuador, 19 de agosto de 1995), es un futbolista ecuatoriano. Juega de Mediocampista y su equipo actual es el Manta FC de la Serie B de Ecuador.


title: Jonathan Saltos

text: Se inició en el Manta FC jugando en las categorías sub-16,sub-18 y reserva, Edwin Cozar en el 2013 le dio la oportunidad de debutar como juvenil en el equipo de primera en una partido contra la CD Universidad Católica donde dicho equipo ganó. En las últimas fechas del 2014 el Manta FC a base de los malos resultados se vio obligado a pelear el descenso donde luchó hasta la última fecha para quedarse en Primera pero desafortunadamente no lo logró y descendió en la última fecha del Campeonato Ecuatoriano de Fútbol.


title: The Ducktators

text: The Ducktators es un cortometraje animado de propaganda antinazi de la serie "Looney Tunes" (Warner Bros.) producida en 1942 por Leo Schlesinger y dirigido por Norman McCabe.


title: The Ducktators

text: La trama es una sátira política de los sucesos que precedieron a la II Guerra Mundial. En ella se muestra a los dirigentes del Fuerzas del Eje (caracterizados como aves) como protagonistas.


title: The Ducktators

text: El título del corto forma un juego de palabras con Duck (Pato) y Dictators (Dictadores).


title: The Ducktators

text: La trama tiene lugar en una granja donde una pareja de patos esperan a su primer pollito. El padre emocionado reparte puros entre los demás animales (patos, gansos y gallinas) mientras la madre avisa de que acaba de poner un huevo, el cual les llama la atención puesto que es negro. Tras eclosionar aparece un pato con las mismas características de Adolf Hitler siendo "Sieg Heil" sus primeras palabras mientras realiza el saludo nazi.


title: The Ducktators

text: Al paso de los años, el polluelo Hitler ha alcanzado la madurez y se dedica a lanzar discursos agresivos tras erigirse líder de la granja. Uno de los animales: un ganso con un fuerte acento italiano en alusión a Benito Mussolini concuerda con sus palabras y se dirige al público como los "inteligentes", ante estas declaraciones, el director interrumpe momentáneamente el corto para lanzar este mensaje: "Queremos pedir disculpas a aquellos NOBLES PATOS y GANSOS que puedan estar entre el público" en referencia a los germanoestadounidenses e italoestadounidenses. El Pato Hitler anima a los voluntarios para que formen un ejército y se unan al futuro Eje, al mismo tiempo Mussolini también ofrece un discurso ante un solo polluelo, el cual es obligado a escuchar y aplaudir. Tras hacerse con las masas, las Stormtroopers organizan marchas por las áreas controladas mientras la Paloma de la paz llora al contemplar el caos.


title: The Ducktators

text: Poco tiempo después se organiza una conferencia de paz, la cual es boicoteada por Hitler furioso que culpa a Mussolini de haber organizado el encuentro. Hitler deposita los tratados de paz en un buzón, que en realidad es una trituradora de papel. Mientras, otro pato procedente del Imperio de Japón (Hirohito) se une a las dos aves europeas para completar así el Eje no sin dificultades, pues una tortuga boba apalea a Hirohito después de que este le colocara en el caparazón un cartel en el que indica la "soberanía japonesa" sobre el lugar, no obstante, el pato japonés intenta hacerse pasar por chino para engañar a la tortuga, aunque no cae en la treta ya que en la chapa que indica su "nacionalidad china" debajo reza que se fabricó en Japón.


title: The Ducktators

text: Una vez los tres juntos, desfilan al ritmo y parodia de la canción infantil: "One, Two, Buckle My Shoe".


title: The Ducktators

text: La Paloma, al verles intenta razonar con ellos, pero al ser ninguneada se enfurece y con paso firme, combate al Eje y a las Stormtroopers con el apoyo de los demás animales de las granjas, incluyendo el pollito que apareció en el discurso de Mussolini y un conejo ruso personificando a Iosif Stalin que deja inconsciente a Hirohito tras propinarle un golpe con una maza.


title: The Ducktators

text: Viendo que no pueden hacer frente a la rebelión, los líderes del Eje huyen despavoridos hasta que a su paso por un póster militar que reza: "Por la victoria, compra bonos de guerra", un soldado emerge del mismo y dispara a las tres aves con su fusil.


title: The Ducktators

text: Varios años después, la Paloma, condecorada como Héroe de Guerra ha formado una familia con dos hijos llamados "Paz" y "Tranquilidad". Esta les explica que a pesar de odiar la guerra no tuvo otra alternativa que hacer frente para que una cosa así no vuelva a suceder. Tras contarles la historia, le muestra a sus hijos la cabeza de los tres dictadores a modo de trofeo de caza.A partir de los años 50 los derechos de la producción fueron adquiridos por Sunset Productions, los cuales eliminaron la escena final en el que la Paloma mostraba las cabezas de los dictadores del Eje Berlín-Roma-Tokio al igual que el mensaje en el que instaban a comprar bonos de guerra. Al ser de dominio público, era más frecuente encontrar la edición cortada que la original, sin embargo, el cortometraje aparece intacto en la edición DVD: "Looney Tunes Golden Edition: Volume 6" así como en el programa especial de Cartoon Network: "ToonhHeads".


title: Willi Neuberger

text: Willi Neuberger (Röllfeld, Alemania ocupada, 15 de abril de 1946) es un exfutbolista alemán que jugaba como defensa.


title: Willi Neuberger

text: Fue internacional con la selección de fútbol de Alemania Occidental en 2 ocasiones.


title: Nikolay Diulgheroff

text: Nikolay Diulgheroff (, "Nikolay Dyulgerov"; 20 de diciembre de 1901–9 de junio de 1982) fue un diseñador, arquitecto y artista búlgaro, que trabajó principalmente en Italia y que se distinguió como miembro del Futurismo italiano del período de entreguerras ("il secondo Futurismo").


title: Nikolay Diulgheroff

text: Diulgheroff nació en Kyustendil, una ciudad del oeste del Principado autónomo de Bulgaria, en el año 1901. Hijo de un impresor, entre 1920 y 1921 estudió en Universidad de Artes Aplicadas (Universität für angewandte Kunst) de Viena, Austria. Al año siguiente, en 1922, estudió en Dresde, Alemania, y en 1923 se matriculó en la Escuela de la Bauhaus de Weimar, donde entabló amistad con el expresionista suizo Johannes Itten. Durante este etapa de estudios, Diulgheroff tuvo oportunidad de exponer sus obras tanto en Berlín como en Dresde. Además, en 1924, el Museo Nacional de Sofía (Bulgaria) organizó una exposición dedicada a él y a sus obras.


title: Nikolay Diulgheroff

text: En 1926, Diulgheroff se instaló en Turín, Italia, para estudiar arquitectura en la Academia Albertina de Bellas Artes, de la que se graduó en 1932. Aunque traía consigo las tendencias del Constructivismo de Europa Central, pronto empezó a relacionarse con figuras prominentes del Futurismo italiano, como por ejemplo Fillìa, y así fue como adoptó este estilo.


title: Nikolay Diulgheroff

text: Diulgheroff creó sus obras más notables en la década de 1920 y 1930, y algunas de ellas se exponen en la actualidad en la Galería Nacional de Arte Moderno de Roma. Sin embargo, antes de que quedaran definitivamente expuestas en dicho museo, se habían podido contemplar previamente en más de cuarenta galerías de arte de toda Europa, como por ejemplo en Leipzig, París, Florencia, Mantua y Venecia.


title: Nikolay Diulgheroff

text: El artista también ayudó a Filippo Tommaso Marinetti y a Fillia a crear la denominada "cocina futurista". En efecto, Diulgheroff colaboró en la redacción del "Manifiesto de Cocina Futurista" (1930), creó el plato denominado "pollofiat" y diseñó parte del interior de la "Taverna Santopalato", el primer establecimiento de cocina futurista. Asimismo, diseñó varios anuncios de bebidas alcohólicas del Grupo Campari.


title: Nikolay Diulgheroff

text: Diulgheroff permaneció en activo casi hasta el final de sus días. Murió en el año 1982 en Turín, en la ciudad en la que había pasado la mayor parte de su vida, hasta un total de 56 años y de la que era ciudadano honorario. Durante toda su trayectoria, había ganado varias medallas de oro en galerías de arte de toda Italia (Turín, Florencia, Salsomaggiore) y algunos historiadores del arte, como Enrico Crispolti, lo han calificado como el mayor artista del período de entreguerras.


title: Oberdan Paterlini

text: Oberdan Paterlini San Carlos de Bolívar, 1916 - Mar del Plata, 18 de junio de 1993) fue un artista argentino correspondiente al movimiento impresionista. Es conocido por sus paisajismos que reflejan espacios patagónicos, principalmente orientado a la localidad de El Bolsón y alrededores, donde realizó la mayor parte de sus obras artísticas, muchas de ellas con reconocimiento nacional e internacional.


title: Oberdan Paterlini

text: Nació el 31 de julio de 1916 en San Carlos de Bolívar. Fue criado por su abuelo junto a sus cinco hermanos. Durante sus años jóvenes se dedicó a diferentes trabajos como panadero, albañil y empleado. Asistió al taller de Demetrio Urruchúa. En su juventud salió de San Carlos de Bolívar para establecerse en Moreno, donde trabajo en una fábrica metalúrgica.


title: Oberdan Paterlini

text: Sus primeros trabajos como pintor surgen alrededor de la época de 1950, junto con su primer viaje a El Bolsón, invitado por Leopoldo Chatruc, donde se enamora de los paisajes patagónicos. Trabajó activamente, hasta que en 1970 decide volver a su ciudad natal.


title: Oberdan Paterlini

text: En 1973 se radica en Mar del Plata con su familia, donde fallece el 18 de junio de 1993.


title: Oberdan Paterlini

text: El artista se caracteriza por sus obras de paisajes patagónicos, mayormente inspirados en la zona de El Bolsón, Bariloche, Esquel.


title: Oberdan Paterlini

text: Su característica impresionista lo llevó a realizar obras premiadas en diversos salones y exposiciones de arte de todo el país, lo bautizaron el "Van Gogh de la Patagonia".


title: Bryan Cabezas

text: Se inició en el Segundo Hoyos Jacome, en 2010 pasa al CS Norte América.


title: Bryan Cabezas

text: En 2011 es contratado por el Independiente José Terán donde jugó en las categorías sub-14, sub-16, sub-18 y Reserva.


title: Bryan Cabezas

text: En 2013 el director técnico Pablo Repetto le dio la oportunidad de debutar en un partido contra el CS Emelec donde se repartieron los puntos. En 2015 debuta en la Copa Libertadores en la repesca contra Estudiantes de la plata donde su equipo se opuso 1-0 de local y perdió 4-0 de visitante quedando así eliminado. En la Copa Libertadores 2016 destaca con una tremenda actuación en los octavos de final frente al Club Atlético River Plate y en semifinales frente al Club Atlético Boca Juniors de Argentina. Al final de la temporada es traspasado a la Serie A (Italia) 2016-17 dejando en Independiente del Valle un registro de 7 goles en 84 partidos.


title: Bryan Cabezas

text: Después de la final de la Copa Libertadores contra Atlético Nacional, es fichado por Atalanta de la Serie A de Italia, por sus buenas actuaciones por la banda izquierda.


title: Bryan Cabezas

text: Al no tener continuidad con el Atalanta, a mediados de 2017 ficha a préstamo por el Panathinaikos F. C. de la Superliga de Grecia. Disputaría un total de 14 partidos marcando un gol por la Superliga de Grecia y dos goles por la Liga Europa de la UEFA.


title: Bryan Cabezas

text: A inicios de 2018 es cedido al Avellino de la Serie B de Italia.


title: Bryan Cabezas

text: Con la Selección de fútbol sub-20 de Ecuador disputó en 2017 el Torneo Sudamericano sub-20 y el Mundial Sub-20 en Corea del Sur, anotando cinco y dos goles respectivamente. Jugó los 9 partidos y marcó un total de 5 goles, de los cuales se destaca un gol a Argentina y un doblete a Colombia en las rondas finales.


title: Bryan Cabezas

text: Marcó por duplicado en el empate contra Estados Unidos, además de participar en los partidos contra Arabia Saudita y Senegal.


title: Lasaeola grancanariensis

text: Lasaeola grancanariensis es una especie de arañas araneomorfas de la familia Theridiidae.


title: Lasaeola grancanariensis

text: Es endémica de las Canarias occidentales (España).


title: Mario Dávila Delgado

text: Mario Alberto Dávila Delgado (n. Frontera, Coahuila; 26 de diciembre de 1959). Es un político mexicano, miembro del Partido Acción Nacional. Ha sido Diputado local y Federal, y Presidente Municipal de Frontera, Coahuila.


title: Mario Dávila Delgado

text: Mario Alberto Dávila Delgado tiene una especialidad en Pediatra y una Licenciatura de Médico Cirujano y Partero, ambos en la Universidad Autónoma de Nuevo León.


title: Mario Dávila Delgado

text: Ha sido electo presidente municipal de Frontera, Coahuila de 2003 a 2005. También donde fue coordinador de la bancada panista. Fue diputado federal desde el 2012 hasta 2015 en la LXII Legislatura del Congreso de la Unión de México en la cual presidió la Comisión de Salud.